乙型肝炎病毒
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乙型肝炎病毒（hepatitis B virus ）簡(jiǎn)稱乙肝病毒，HBV。是一種DNA病毒，屬于嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）。根據(jù)目前所知，HBV就只對(duì)人和猩猩有易感性，引發(fā)乙型病毒性肝炎疾病。完整的乙肝病毒成顆粒狀，也會(huì)被稱為丹娜顆粒（Dane）。1970年由丹娜發(fā)現(xiàn)。直徑為42納米。顆粒分為外殼和核心兩部分。乙型肝炎病毒基因組長(zhǎng)約3.2kb ，為部分雙鏈環(huán)狀DNA。HBV 的抵抗力較強(qiáng)，但65℃10 小時(shí) 、煮沸10 分鐘 或高壓蒸氣均可滅活HBV。含氯制劑、環(huán)氧乙烷、戊二醛、過氧乙酸和碘伏等也有較好的滅活效果。我國(guó)的乙肝病毒感染率約60%-70%；乙肝表面抗原攜帶率約占總?cè)丝诘?.18%，以此計(jì)算，全國(guó)約有9300萬人攜帶乙肝病毒，其中乙肝患者大約有3000萬。
目錄 |
基本概述
HBV只有3200bp，是一個(gè)相當(dāng)小的病毒。其基因組共有四個(gè)ORF，編碼以下一些蛋白：Core蛋白和pre-core蛋白，Pol蛋白，X蛋白，以及S蛋白（L，M，S）。Core是核衣殼蛋白；Pre-core現(xiàn)在不知道有何功能，它對(duì)病毒的復(fù)制不是必要的，但是可能與抑制宿主的免疫反應(yīng)有關(guān)；X蛋白對(duì)病毒復(fù)制是重要的，還與肝癌的發(fā)生有關(guān)；S蛋白是病毒的包膜蛋白，與病毒進(jìn)入細(xì)胞有關(guān)。
HBV病毒的生活史
簡(jiǎn)單描述一下就是核衣殼-cccDNA-mRNA-rcDNA-核衣殼-組裝釋放。所以實(shí)際上HBV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，HBV的復(fù)制是離不開逆轉(zhuǎn)錄的。
醫(yī)科大學(xué)視頻《乙型肝炎病毒》魯鳳民教授主講
基因結(jié)構(gòu)
目前，已可從感染HBV病人的血清中及感染肝臟提純的病毒核心中分離出環(huán)狀雙股DNA，從而確定HBV屬DNA病毒。目前，由于克隆化DNA完整核苷酸已經(jīng)確定，現(xiàn)已證實(shí)HBsAg和HBcAg都是由Dane顆粒的DNA所編碼，并且二類基因存在同一DNA分子上。有人比較病毒基因編碼能力和病毒多少，發(fā)現(xiàn)HBV DNA負(fù)鏈能編碼全部已知的HBV蛋白質(zhì)，而其正鏈開放讀碼區(qū)，不能編碼病毒蛋白。HBVDNA負(fù)鏈有四個(gè)開放區(qū)，分別稱為S、C、P及X，能編碼全部已知的HBV蛋白質(zhì)。S區(qū)可分為二部分，S基因和前S基因。S基因能編碼主要表面蛋白。S基因之前是一個(gè)能編碼163個(gè)氨基酸的前S基因，編碼Pre S1和Pre S2蛋白。C區(qū)基因包括前C基因和C基因，分別編碼HBeAg和HBcAg。P區(qū)最長(zhǎng)，約占基因組75%以上，編碼病毒體DNA多聚酶。X區(qū)可能編碼有154個(gè)氨基酸的堿性多肽?！ ?/p>
hbv的變異
由于HBV DNA在復(fù)制時(shí)，有一個(gè)逆轉(zhuǎn)錄過程，故易發(fā)生變異
s區(qū)變異可出現(xiàn)表面抗原與表面抗體共存，或者出現(xiàn)表面抗原陰性或表面抗體陰性的慢性乙肝，還可致使乙肝疫苗接種失敗。前c/c區(qū)基因發(fā)生變異，能影響e抗原產(chǎn)生，故檢查e抗原時(shí)可呈陰性結(jié)果，此時(shí)并不反映hbv復(fù)制減少和消失，而且有可能易于引起重癥肝炎。x區(qū)變異可使hbv dna復(fù)制下降從而使血清中hbv標(biāo)志物全部陰性，然而檢測(cè)x基因則為陽性。
慢性乙型肝炎的自然史
乙肝病毒的活動(dòng)受到機(jī)體免疫系統(tǒng)的控制，因此總是此消彼長(zhǎng)的過程，但是innate和adaptive以及病毒變異的過程是非常復(fù)雜的?？偟膩碚f，免疫系統(tǒng)漠視病毒的存在，保持免疫耐受狀態(tài)時(shí)是一個(gè)免疫平衡；免疫系統(tǒng)強(qiáng)大到控制病毒又是另一個(gè)平衡；而雙方反復(fù)搏斗的過程就會(huì)造成肝臟損傷。
病毒性肝炎，肝纖維化，脂肪肝，酒精肝，藥物性肝損害及肝硬化，肝癌等肝病是當(dāng)今社會(huì)威脅人類健康的主要疾病之一。據(jù)最新統(tǒng)計(jì)病毒性肝炎和乙肝病毒攜帶者在我國(guó)人群當(dāng)中有14%以上人口感染。正因?yàn)檫@兩種病毒性肝炎攜帶者在生活當(dāng)中在親情，愛情，入學(xué)，就業(yè)，出國(guó)，社交等方面都有不同程度的影響，甚至歧視，許多患者病急亂投醫(yī)，不但沒得到最佳治療效果，反而延誤了治療時(shí)間，致使病情加重，發(fā)展到肝纖維化，肝腹水，肝腹化和肝癌的發(fā)生。更有認(rèn)同“乙肝無治論”之說，使病毒性肝炎乙肝患者失去治療信心，使病毒在體內(nèi)反復(fù)復(fù)制，產(chǎn)生病變。這也是肝纖維，肝硬化，肝癌的發(fā)病原因。致使每年死于肝硬化，肝癌的患者就有一百多萬人?！ ?/p>
乙型肝炎病毒的傳播途徑
引乙型肝炎的傳播途徑有以下幾種：血源性傳播，醫(yī)源性傳播，母嬰傳播，生殖細(xì)胞傳播，密切接觸傳播（性接觸為主），吸血昆蟲（蚊子，臭蟲等）傳播，飲食傳播的可能性很小。
血源性傳播是乙肝的主要傳播途徑。所以預(yù)防乙肝主要是嚴(yán)格檢查供血者。盡量不使用血液及血制品，特別是進(jìn)口血液制品?！♂t(yī)源性傳播主要是注射器不消毒重復(fù)使用，拔牙用具及其它創(chuàng)傷性醫(yī)療器消毒不嚴(yán)而造成傳播。預(yù)防應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)療制度，增強(qiáng)無菌觀念，實(shí)行一人針一用一消毒，是預(yù)防乙肝經(jīng)醫(yī)源性傳播的關(guān)鍵?！?/p>
母嬰傳播是通過胎盤傳播和經(jīng)過產(chǎn)道傳播兩種方式實(shí)現(xiàn)。乙肝免疫球蛋白可以有效地抑制乙肝母嬰或父嬰的傳播，有效率可達(dá)百分之九十以上。
性傳播：乙肝病毒的性傳播是性伙伴感染的重要途徑，這種傳播亦包括家庭夫妻之間的傳播。
密切接觸傳播的幾率較低，有人曾做統(tǒng)計(jì)僅為12%，一般的接觸不會(huì)傳播乙型肝炎。
其他傳播途徑有吸血昆蟲叮咬，如蚊子，臭蟲等，所以要注意消滅害蟲，防止害蟲叮咬。乙型肝炎飲食傳播的可能性很小，使用公筷和分餐制還是有必要的。
廣泛地接種乙肝疫苗，是預(yù)防乙型肝炎的主要方法?！?/p>
消毒處理
乙型肝炎病毒的消毒處理對(duì)控制乙型肝炎的傳播具有十分重要的意義。20世紀(jì)90年代末研究發(fā)現(xiàn)，乙型肝炎病毒對(duì)多種常用的消毒方法均很敏感，如熱力消毒98°C2分鐘即可使乙型肝炎病毒滅活而失去感染性；常用的含氯制劑如0.5%的次氯酸鈉，1分鐘即使乙型肝炎病毒脫氧核糖核聚合酶滅活；而過氧乙酸、環(huán)氯乙烷、碘制劑及戊二醛等，對(duì)乙型肝炎病毒的滅活作用既肯定又確切，都極大地充實(shí)了乙型肝炎病毒的消毒方法。
高壓蒸汽可以說是殺滅乙型肝炎病毒的既簡(jiǎn)便易行又完全徹底的方法。但因許多物品、器材經(jīng)不起高壓蒸汽消毒，故又推薦采用對(duì)金屬無腐蝕作用的戊二醛消毒被污染的器械（如電鏡、內(nèi)鏡等），效果相當(dāng)滿意，但價(jià)格昂貴。對(duì)不耐高溫的物品的消毒，像疫苗與抗生素等，目前則采用r射線、X線和電子輻射消毒。這些射線能穿透塑料制品的包裝，可達(dá)到完全殺滅病毒的止的，但常使人造纖維失去張力，使一些藥品色澤改變，故也難在國(guó)內(nèi)推廣。
目前對(duì)紡織品、皮毛、塑料制品、文物、小型精密儀器、內(nèi)鏡、監(jiān)護(hù)裝置、人工眼球器材等都采用環(huán)氧乙烷蒸氣消毒。而其他常用市售化學(xué)消毒劑則可根據(jù)具體情況選用。
常用于殺滅乙型肝炎病毒的化學(xué)消毒劑有以下幾種：
（1）氯制劑：如3%的漂白粉、含有效氯250*106的二氯異氰尿酸鈉及氯化磷酸三鈉等，室溫下15分鐘，用于清洗器皿和餐具，消毒效果滿意。
（2）氧化劑：0.2%-0.5%過氧乙酸及15%過氧化氫，在室溫下作用10-30分鐘，可作外科移植物的消毒劑。用于患者餐具的浸泡，可殺滅乙型肝炎病毒。
（3）烷化劑：2%戊二醛，用于手術(shù)器械、電鏡的擦拭消毒，10%甲醛可用于血液制品中乙型肝炎病毒的消毒。
（4）碘化劑：1%碘酊25°C作用15分鐘以上可用于消毒體溫計(jì)、各種醫(yī)用導(dǎo)管及牙科器械等。但應(yīng)注意密閉，以免碘升華。消毒后應(yīng)消除表面沾有的碘液。有條件時(shí)可選用碘伏（含有效碘200*10-6）則效果更好。而與肝炎患者更密切接觸者，如家屬及醫(yī)護(hù)人員，則主張選用肥皂和流水沖洗至少2遍以上，以盡量減少手上皮膚沾染的乙型肝炎病毒，然后再用0.1%-0.5%過氧乙酸或含200*10-6有效碘的碘伏浸泡雙手1-2分鐘。
乙肝病毒基因檢查的方法有哪些
用于乙肝病毒基因檢查的方法主要有：熒光PCR法、競(jìng)爭(zhēng)PCR法、PCR酶聯(lián)免疫吸附法、熒光標(biāo)記物法和PCR酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光等方法。這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，所使用的儀器設(shè)備、試劑品質(zhì)源于不同的國(guó)家和地區(qū)，設(shè)立的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及標(biāo)準(zhǔn)熒光等各不相同，得出的數(shù)值左右漂浮，偏差很大，得出的檢測(cè)值范圍也不相同。
乙肝病毒基因檢查的實(shí)驗(yàn)室診斷主要依賴于血清特異性抗原抗體（ELISA）檢測(cè)和乙肝病毒基因（HBV-DNA）檢測(cè)。ELISA方法一直是臨床診斷HBV感染的傳統(tǒng)手段，反映機(jī)體HBV感染的免疫狀態(tài)。而HBV-DNA檢測(cè)則是采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)，特異性擴(kuò)增乙肝病毒基因組保守的C基因區(qū)上270bp基因片段，以近于2n的指數(shù)（n為循環(huán)次數(shù)），在數(shù)小時(shí)內(nèi)可將極微量的HBV-DNA特定的分子片斷擴(kuò)增至1x107～1x108倍，大大提高了HBV的檢出率，為臨床診斷是否為HBV感染提供了一種強(qiáng)有力的手段。
三種形態(tài)
感染乙肝病毒的病人血清中有三種不同形態(tài)的顆粒，分別為大球形顆粒(直徑42nm)、小球形顆粒(直徑22nm)和管形顆粒(直徑22nm)。
其中，大球形顆粒又稱Dane顆粒，是1970年Dane首先用電鏡在乙肝病人血清中發(fā)現(xiàn)的。Dane顆粒是有感染性的完整HBV顆粒，呈球形，具有雙層衣殼。外衣殼由來自宿主的脂質(zhì)雙層和包膜蛋白組成，有大約400個(gè)HBV表面抗原（HBsAg）即蛋白鑲嵌于脂質(zhì)雙層中。用離子去垢劑如NP-40處理病毒顆粒，去除病毒外衣殼后，暴露出內(nèi)層核心。核心的表面為病毒的內(nèi)衣殼，內(nèi)衣殼蛋白為HBV核心抗原（HBcAg）。HBcAg經(jīng)酶或去垢劑作用后可暴露出e抗原(HBeAg)。核心顆粒中間包裹著雙鏈DNA分子、DNA聚合酶（P蛋白）等。
而小球形顆粒和由小球形顆粒串聯(lián)而成的管形顆粒均由病毒的包膜蛋白構(gòu)成，不含病毒基因組，因而不具有感染性，被稱為亞病毒顆粒。
乙肝病毒抗原及其對(duì)應(yīng)抗體
由上可知，HBV的抗原有3種：表面抗原（HBsAg）、核心抗原（HBcAg）和e抗原（HBeAg）。表面抗原大量存在于感染者血液中，是HBV感染以及檢測(cè)的主要標(biāo)志。它具有抗原性，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特意保護(hù)性的抗-HBs，也是制備疫苗的最主要成分。
核心抗原由183個(gè)或185個(gè)氨基酸組成，高度磷酸化，是乙肝病毒核心顆粒的唯一結(jié)構(gòu)蛋白。正由于它存在于Dane顆粒核心結(jié)構(gòu)表面，被表面抗原覆蓋，故不易在血循環(huán)中檢出。核心抗原具有強(qiáng)免疫原性，可誘導(dǎo)很強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗-HBc。
e抗原為可溶性蛋白質(zhì)，傳染性強(qiáng)，游離存在于血液中，雖然很早就被發(fā)現(xiàn)，在病理上認(rèn)為是HBV復(fù)制以具有強(qiáng)感染性的一個(gè)指標(biāo)，但其功能尚不清楚?？?HBe的出現(xiàn)，是預(yù)后良好的征象。
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