抗核抗體
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抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）又稱(chēng)抗核酸抗原抗體，是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分[脫氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等]作為靶抗原的自身抗體的總稱(chēng)，能與所有動(dòng)物的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)，主要存在于血清中，也可存在于胸水、關(guān)節(jié)滑膜液和尿液中?！ ?/p>
目錄 |
原理簡(jiǎn)介
抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽(yáng)性率，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE，95%~100%）、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA，10%~20%）、混合性結(jié)締組織病（MCTD，80%~100%）、干燥綜合癥（SjS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼瘡性肝炎（95%~100%）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（95%~100%）等，但經(jīng)皮質(zhì)激素治療后，陽(yáng)性率可降低。抗核抗體在類(lèi)風(fēng)濕病人中約有20％～50％IgG型ANA呈陽(yáng)性，小兒類(lèi)風(fēng)濕ANA的陽(yáng)性率約19％～35％，伴發(fā)虹膜睫狀體炎者陽(yáng)性率高（505~90%），故ANA陽(yáng)性預(yù)示類(lèi)風(fēng)濕有發(fā)生慢性睫狀體炎的可能。已發(fā)現(xiàn)75％類(lèi)風(fēng)濕病人有多形核白細(xì)胞的特異性ANA或抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）可使白細(xì)胞核受到破壞?！ ?/p>
詳細(xì)內(nèi)容
抗核抗體是一組對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA，RNA，蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物的自身抗體。按其核內(nèi)各個(gè)分子的性能不同可將各ANA區(qū)分開(kāi)來(lái)，如(一)抗DNA抗體，（二）抗組蛋白抗體，（三）抗非組蛋白抗體，（四）抗核仁抗體等。每一大類(lèi)又因不同抗原特性而再分為許多種類(lèi)。因此ANA在廣義上是一組各有不同臨床意義的自身抗體，更確切的名稱(chēng)應(yīng)為抗核抗體譜。ANA 主要存在于IgG，也見(jiàn)于IgM 、IgA，甚至LgD及LgE中。
常見(jiàn)的核免疫熒光杭核抗體試驗(yàn)有以下幾種圖形：（1）均質(zhì)型：核質(zhì)染色均勻一致，這種染色型常與抗組蛋白和抗DNA抗體有關(guān)；（2）斑點(diǎn)型：核質(zhì)染色呈斑點(diǎn)狀，抗可提取性核抗原（ENA）抗體常呈這種染色型；（3）周邊型：熒光染色圍繞在核膜周?chē)?，它與抗DNA抗體有關(guān)；（4）核仁型：僅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗體呈現(xiàn)這種染色型；（5）著絲點(diǎn)型：在體外培養(yǎng)的細(xì)胞株（喉癌細(xì)胞）在核分裂相期時(shí)，可見(jiàn)到熒光染色的著絲點(diǎn)排列成特殊圖型，而在鼠肝做底物中看不到此類(lèi)圖型，而被遺漏?！ ?/p>
標(biāo)本采集
采血3ml，不抗凝。
正常值范圍
滴度<1:10（間接熒光法）。
臨床意義
陽(yáng)性：主要SLE患者，它的滴度可達(dá)1：320占86％，如果經(jīng)激素治療后緩解或危重時(shí)，大量抗核抗體形成免疫復(fù)合物時(shí)，ANA反為陰性，其他自身免疫性疾病，ANA也可出現(xiàn)陽(yáng)性，但滴度低于1：80。
抗核抗體分類(lèi)
抗核抗體的分類(lèi)，由于核抗原不同，有多種不同的ANA ?！ ?/p>
抗DNA抗體
抗DNA抗體有抗雙鏈DNA（ds DNA）和抗單鏈(ss DNA)抗體之分?？筪s DNA抗體與SLE的關(guān)系密切，且隨疾病的活動(dòng)度而升降，病情好轉(zhuǎn)者其滴度多下降甚或轉(zhuǎn)陰?？箂s DNA抗體則與抗ds DNA不同，可在多種疾病出現(xiàn)，包括一些非自身免疫性疾病，如細(xì)菌和病毒感染。故在臨床上無(wú)實(shí)用價(jià)值。而抗ds DNA抗體被認(rèn)為是紅斑狼瘡（SLE）所特有。
測(cè)定本抗體的方法有間接免疫熒光法（IFA），放射免疫法（Farr法），ELISA，血凝法等。我國(guó)的臨床工作者多采用前兩種方法，尤其是IFA法。它是以短膜蟲(chóng)或馬錐蟲(chóng)為底物，利用其體內(nèi)含有的純雙鏈DNA，進(jìn)行免疫熒光測(cè)定。 血清稀釋度達(dá)1：5或更高者稱(chēng)為陽(yáng)性。以Farr法測(cè)抗DNA抗體，結(jié)合率＞20％者為陽(yáng)性。據(jù)北京協(xié)和醫(yī)院資料顯示，SLE陽(yáng)性率為62％，活動(dòng)期67.7％，緩解期29.1％，非SLE者陽(yáng)性率雖達(dá)20％，但其結(jié)合率多在30％以下。有7％的正常人呈假性反應(yīng)。結(jié)合率高于30％者幾乎都是活動(dòng)期SLE。
抗DNA的自身抗體在SLE發(fā)病中起一定作用。在一些SLE患者，DNA大分子存在于循環(huán)中或粘附于多種器官的微血管結(jié)構(gòu)，這些循環(huán)或器官原位抗原型DNA均可與循環(huán)自身抗體發(fā)生反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物，激活炎癥系統(tǒng)，在一些器官如腎臟，肺和腦組織引起免疫復(fù)合物介導(dǎo)的疾病，導(dǎo)致組織損傷。
抗可提取的核抗原
（extractable nuclear antigen.ENA）抗體，此抗體原經(jīng)鹽水或磷酸緩沖液處理，易從胞核中提取出來(lái)，且不含DNA。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)，抗ENA抗體型染色多呈斑點(diǎn)型。此類(lèi)抗原分為九種，故產(chǎn)生九種相應(yīng)抗體。
（1）抗核糖核蛋白抗體(antiribonucleoprotein；抗RNP抗體)：抗原來(lái)源與SM相同。它對(duì)去氧核糖核酸酶不敏感，但對(duì)核糖核酸酶，胰酶敏感。1972年把它作為診斷混合性結(jié)締組織?。∕CTD）的重要血清學(xué)依據(jù)。但以后發(fā)現(xiàn)本抗體可在多種風(fēng)濕性疾病出現(xiàn)，不具備對(duì)某個(gè)病的特異性，但有助于鑒別結(jié)締組織病和非結(jié)締組織病。抗核RNP抗體見(jiàn)于近32％的SLE患者，幾乎見(jiàn)于所有MCTD患者。
（2）抗SM抗體：SM系一患者Smith的簡(jiǎn)稱(chēng)。1966年Tan&Kunkel首先在患者Smith體中發(fā)現(xiàn)?？乖瓉?lái)源于小牛，兔胸腺，人脾等組織的一種酸性糖蛋白?？筍M抗體可見(jiàn)于1/3或以上的SLE患者，不出現(xiàn)于其他疾病中，對(duì)SLE診斷有特異性，成為很有價(jià)值的SLE診斷標(biāo)志，但無(wú)此抗體不能排除診斷。
（3）抗SS-A抗體：系在發(fā)現(xiàn)Sjogren氏綜合征（SS）的"A"抗原后而命名，主要見(jiàn)于SS。本抗原可以從人、牛、豬脾中提取。它除存在核內(nèi)外，也存在于細(xì)胞漿內(nèi)。對(duì)胰酶敏感，對(duì)核糖核酸酶抵抗，能耐熱（56度）。
（4）抗Ha抗體：抗Ha抗體可與小牛胸腺可溶性核提取物(以及小牛和鼠的肝提取物)起反應(yīng)。見(jiàn)于SS患者,亦稱(chēng)之為SS-B抗體.應(yīng)用沉淀素反應(yīng)，補(bǔ)體結(jié)合以及熒光技術(shù)檢測(cè)。目前多數(shù)人認(rèn)為13％SLE及33％SS患者有抗Ha沉淀性抗體。
（5）抗PM-1抗體：系多發(fā)性肌炎的特異性抗體。抗原系小牛胸腺核提取物，有人暫稱(chēng)之為PM-1。最初有人應(yīng)用補(bǔ)體結(jié)合抑制試驗(yàn)，確定該抗體特性，在皮肌類(lèi)患者中發(fā)現(xiàn)PM-1抗體。有人測(cè)定在多發(fā)性肌類(lèi)患者陽(yáng)性率13.6％，皮肌類(lèi)（DM）20％，系統(tǒng)性硬化并肌炎25％，SLE并肌炎偶有陽(yáng)性，在其他疾病和正常人均陰性。說(shuō)明本抗體對(duì)肌炎診斷有一定特異性。
（6）抗MA1抗體：為近年發(fā)現(xiàn)抗核酸蛋白抗原的抗體，稱(chēng)之為抗MA1抗體。該抗體只出現(xiàn)于某些嚴(yán)重的SLE患者中。
（7）抗Scl-70抗體：因出現(xiàn)在硬皮病且其分子量為70000，故名?？乖瓰閴A性非組蛋白，北京協(xié)和醫(yī)院對(duì)系統(tǒng)性硬化用免疫雙擴(kuò)散法測(cè)定得抗Scl-70抗體陽(yáng)性率為60％。在其他結(jié)締組織和非結(jié)締組織病偶有陽(yáng)性，而正常人均陰性，說(shuō)明本抗體有較高的特異性，是系統(tǒng)性硬化的標(biāo)記抗體。
（8）抗Jo-1抗體：因患者而命名。國(guó)外報(bào)道在多發(fā)性肌炎（PM）患者陽(yáng)性率為30-50％，合并有肺間質(zhì)纖維化的肌炎則達(dá)60％，而在皮肌炎（DM）患者則低于10％，在其他疾病均陰性。
（9）抗Ku抗體：因患者命名，國(guó)外報(bào)道本抗體多見(jiàn)于合并有肌炎的系統(tǒng)性硬化患者，陽(yáng)性率達(dá)55％。
總之，抗PM-1，抗Jo-1，抗Ku都與肌炎有關(guān)?！ ?/p>
抗組蛋白抗體
組蛋白是一組堿性蛋白質(zhì)，含有稍高量的賴(lài)氨酸及精氨酸。是與DNA形成的復(fù)合物，結(jié)合成DNA一組蛋白。組蛋白抗體見(jiàn)于藥物誘發(fā)的SLE。國(guó)外報(bào)道，用免疫熒光三步法測(cè)23例藥物致狼瘡陽(yáng)性率為96％，12例SLE中42％陽(yáng)性。北京協(xié)和醫(yī)院以同樣方法檢測(cè)488例服用異煙肼，68例服用苯妥英鈉，40例服用復(fù)降片（內(nèi)含肼苯噠嗪），都在服用6個(gè)月以上者和另133例服他巴唑3個(gè)月以上者，無(wú)一例查到本抗體。這種差異可能與近年來(lái)我國(guó)服用肼苯噠嗪和普魯卡因酰胺的患者較少之故，也不能除外人種不同而造成的差異?！ ?/p>
抗著絲點(diǎn)抗體
其抗原為緊附于染色體著絲點(diǎn)的DNA蛋白質(zhì)。因此需要選擇分裂相活躍的細(xì)胞作為底物，這種細(xì)胞的著絲點(diǎn)較易被暴露。多選用人喉癌上皮細(xì)胞（HEP-2），其優(yōu)點(diǎn)是核大，分裂相多。國(guó)外報(bào)道本抗體多見(jiàn)于CREST綜合征（即表現(xiàn)為軟組織鈣化，雷諾現(xiàn)象，食管功能低下，指端硬化，毛細(xì)血管擴(kuò)張）。陽(yáng)性率達(dá)90％以上，稱(chēng)之為CREST的標(biāo)記抗體。根據(jù)協(xié)和醫(yī)院觀(guān)察測(cè)定結(jié)果，我國(guó)系統(tǒng)性硬化絕大部分是彌散型，CREST型極少見(jiàn)；抗著絲點(diǎn)抗體的陽(yáng)性率在系統(tǒng)性硬化為20％，CREST型38％，彌散型10％，說(shuō)明它不一定是CREST型的標(biāo)記抗體?！ ?/p>
抗核仁抗體
抗核仁抗體是一組對(duì)核仁不同RNA成分的抗體。由于成分（4-6sRNA）不同，因此構(gòu)成斑塊，斑點(diǎn)，均質(zhì)等不同圖型。本核體在以HEP-2細(xì)胞為底物間接免疫熒光檢查為明顯。協(xié)和醫(yī)院免疫組的陽(yáng)性率是PSS38.5％，SLE6.1％，RA15.3％，（陽(yáng)性者都合并有指端硬化），SS8.6％，PM/DM10.0％，雷諾現(xiàn)象25％，其他結(jié)締組織病和正常人均陰性?？购巳士贵w不僅在PSS最多見(jiàn)，且滴度亦高，故它對(duì)PSS診斷有一定的幫助。
抗核抗體的檢測(cè)在自身免疫病的臨床診斷、鑒別診斷、評(píng)價(jià)療效和預(yù)后估計(jì)中具有較大的意義，因此常將抗核抗體的檢測(cè)作為自身免疫病的重要初篩試驗(yàn)。
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