顯微鏡
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顯微鏡是由一個(gè)透鏡或幾個(gè)透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器，是人類進(jìn)入原子時(shí)代的標(biāo)志。主要用于放大微小物體成為人的肉眼所能看到的儀器。顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡：光學(xué)顯微鏡是在1590年由荷蘭的楊森父子所首創(chuàng)?，F(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡可把物體放大1600倍，分辨的最小極限達(dá)0.1微米，國內(nèi)顯微鏡機(jī)械筒長度一般是160mm。國內(nèi)主要生產(chǎn)廠家上海光學(xué)儀器廠 等
顯微鏡是人類各個(gè)時(shí)期最偉大的發(fā)明物之一。在它發(fā)明出來之前，人類關(guān)于周圍世界的觀念局限在用肉眼，或者靠手持透鏡幫助肉眼所看到的東西。
顯微鏡把一個(gè)全新的世界展現(xiàn)在人類的視野里。人們第一次看到了數(shù)以百計(jì)的“新的”微小動物和植物，以及從人體到植物纖維等各種東西的內(nèi)部構(gòu)造。顯微鏡還有助于科學(xué)家發(fā)現(xiàn)新物種，有助于醫(yī)生治療疾病。上圖：這是17世紀(jì)英國科學(xué)家羅伯特.胡克的顯微鏡。它有一根內(nèi)裝透鏡的簡易皮管，安放在一個(gè)可調(diào)整的架子上。灌滿水的玻璃球用來把光聚焦到物體上。
最早的顯微鏡是16世紀(jì)末期在荷蘭制造出來的。發(fā)明者可能是一個(gè)叫做札恰里亞斯.詹森的荷蘭眼鏡商，或者另一位荷蘭科學(xué)家漢斯.利珀希，他們用兩片透鏡制作了簡易的顯微鏡，但并沒有用這些儀器做過任何重要的觀察。
后來有兩個(gè)人開始在科學(xué)上使用顯微鏡。第一個(gè)是意大利科學(xué)家伽利略。他通過顯微鏡觀察到一種昆蟲后，第一次對它的復(fù)眼進(jìn)行了描述。第二個(gè)是荷蘭亞麻織品商人安東尼.凡.列文虎克（1632年-1723年），他自己學(xué)會了磨制透鏡。他第一次描述了許多肉眼所看不見的微小植物和動物。
1931年，恩斯特.魯斯卡通過研制電子顯微鏡，使生物學(xué)發(fā)生了一場革命。這使得科學(xué)家能觀察到像百萬分之一毫米那樣小的物體。1986年他被授予諾貝爾獎?！ ?/p>
目錄 |
儀器簡介
■中文名稱
顯微鏡
■英文名稱
microscope
■儀器簡介
光學(xué)顯微鏡的種類很多，除一般的外，主要有：
①暗視野顯微鏡：一種具有暗視野聚光鏡，從而使照明的光束不從中央部分射入，而從四周射向標(biāo)本的顯微鏡。
②熒光顯微鏡：以紫外線為光源，使被照射的物體發(fā)出熒光的顯微鏡。電子顯微鏡是在1931年在德國柏林由克諾爾和哈羅斯卡首先裝配完成的。這種顯微鏡用高速電子束代替光束。由于電子流的波長比光波短得多，所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)可達(dá)80萬倍，分辨的最小極限達(dá)0.2納米。1963年開始使用的掃描電子顯微鏡更可使人看到物體表面的微小結(jié)構(gòu)。
■主要用途
顯微鏡被用來放大微小物體的圖像。一般應(yīng)用于對生物、醫(yī)藥、微觀粒子等觀測。
（1）利用微微動載物臺之移動，配全目鏡之十字座標(biāo)線，作長度量測。
（2）利用旋轉(zhuǎn)載物臺與目鏡下端之游標(biāo)微分角度盤，配全合目鏡之址字座標(biāo)線，作角度量測，令待測角一端對準(zhǔn)十字線與之重合，然后再讓另一端也重合。
（3）利用標(biāo)準(zhǔn)檢測螺紋的節(jié)距、節(jié)徑、外徑、牙角及牙形等尺寸或外形。
（4）檢驗(yàn)金相表面的晶粒狀況。
（5）檢驗(yàn)工件加工表面的情況。
（6）檢測微小工件的尺寸或輪廓是否與標(biāo)準(zhǔn)片相符。
儀器結(jié)構(gòu)
■光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)
普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分：機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。
◆機(jī)械部分
（1）鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個(gè)鏡體。
（2）鏡柱：是鏡座上面直立的部分，用以連接鏡座和鏡臂。
（3）鏡臂：一端連于鏡柱，一端連于鏡筒，是取放顯微鏡時(shí)手握部位。
（4）鏡筒：連在鏡臂的前上方，鏡筒上端裝有目鏡，下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。
（5）物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)器)：接于棱鏡殼的下方，可自由轉(zhuǎn)動，盤上有3-4個(gè)圓孔，是安裝物鏡部位，轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，可以調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡，當(dāng)聽到碰叩聲時(shí)，方可進(jìn)行觀察，此時(shí)物鏡光軸恰好對準(zhǔn)通光孔中心，光路接通。轉(zhuǎn)換物鏡后，不允許使用粗調(diào)節(jié)器，只能用細(xì)調(diào)節(jié)器，使像清晰。
（6）鏡臺(載物臺)：在鏡筒下方，形狀有方、圓兩種，用以放置玻片標(biāo)本，中央有一通光孔，我們所用的顯微鏡其鏡臺上裝有玻片標(biāo)本推進(jìn)器(推片器)，推進(jìn)器左側(cè)有彈簧夾，用以夾持玻片標(biāo)本，鏡臺下有推進(jìn)器調(diào)節(jié)輪，可使玻片標(biāo)本作左右、前后方向的移動。
（7）調(diào)節(jié)器：是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋，調(diào)節(jié)時(shí)使鏡臺作上下方向的移動。
①粗調(diào)節(jié)器(粗螺旋)：大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器，移動時(shí)可使鏡臺作快速和較大幅度的升降，所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中，通常在使用低倍鏡時(shí)，先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。
②細(xì)調(diào)節(jié)器(細(xì)準(zhǔn)焦螺旋)：小螺旋稱細(xì)調(diào)節(jié)器，移動時(shí)可使鏡臺緩慢地升降，多在運(yùn)用高倍鏡時(shí)使用，從而得到更清晰的物象，并借以觀察標(biāo)本的不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。
◆照明部分
裝在鏡臺下方，包括反光鏡,集光器。
（1）反光鏡：裝在鏡座上面，可向任意方向轉(zhuǎn)動，它有平、凹兩面，其作用是將光源光線反射到聚光器上，再經(jīng)通光孔照明標(biāo)本，凹面鏡聚光作用強(qiáng)，適于光線較弱的時(shí)候使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。
（2）集光器(聚光器)位于鏡臺下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。
①聚光鏡：由一片或數(shù)片透鏡組成，起匯聚光線的作用，加強(qiáng)對標(biāo)本的照明，并使光線射入物鏡內(nèi)，鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋，轉(zhuǎn)動它可升降聚光器，以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強(qiáng)弱。
②光圈(虹彩光圈)：在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小，以調(diào)節(jié)光量。
◆光學(xué)部分
（1）目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有2-3個(gè)，上面刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10×的目鏡。
（2）物鏡：裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上，一般有3-4個(gè)物鏡，其中最短的刻有“10×”符號的為低倍鏡，較長的刻有“40×”符號的為高倍鏡，最長的刻有“100×”符號的為油鏡，此外，在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線，以示區(qū)別。
顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數(shù)就為10×10=100。
■電子顯微鏡結(jié)構(gòu)
電子顯微鏡由鏡筒、真空系統(tǒng)和電源柜三部分組成。鏡筒主要有電子槍、電子透鏡、樣品架、熒光屏和照相機(jī)構(gòu)等部件，這些部件通常是自上而下地裝配成一個(gè)柱體；真空系統(tǒng)由機(jī)械真空泵、擴(kuò)散泵和真空閥門等構(gòu)成，并通過抽氣管道與鏡筒相聯(lián)接,電源柜由高壓發(fā)生器、勵磁電流穩(wěn)流器和各種調(diào)節(jié)控制單元組成。
◆電子透鏡
電子透鏡是電子顯微鏡鏡筒中最重要的部件，它用一個(gè)對稱于鏡筒軸線的空間電場或磁場使電子軌跡向軸線彎曲形成聚焦，其作用與玻璃凸透鏡使光束聚焦的作用相似，所以稱為電子透鏡。現(xiàn)代電子顯微鏡大多采用電磁透鏡，由很穩(wěn)定的直流勵磁電流通過帶極靴的線圈產(chǎn)生的強(qiáng)磁場使電子聚焦。
◆電子槍
電子槍是由鎢絲熱陰極、柵極和陰極構(gòu)成的部件。它能發(fā)射并形成速度均勻的電子束，所以加速電壓的穩(wěn)定度要求不低于萬分之一?！ ?/p>
成像原理
光學(xué)顯微鏡成像原理
光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物臺和反光鏡組成。目鏡和物鏡都是凸透鏡，焦距不同。物鏡相當(dāng)于投影儀的鏡頭，物體通過物鏡成倒立、放大的實(shí)像。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡，該實(shí)像又通過目鏡成正立、放大的虛像。反光鏡用來反射，照亮被觀察的物體。反光鏡一般有兩個(gè)反射面：一個(gè)是平面，在光線較強(qiáng)時(shí)使用；一個(gè)是凹面，在光線較弱時(shí)使用。
電子顯微鏡成像原理
電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。
電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點(diǎn)的最小間距來表示。20世紀(jì)70年代，透射式電子顯微鏡的分辨率約為0.3納米(人眼的分辨本領(lǐng)約為0.1毫米)。現(xiàn)在電子顯微鏡最大放大倍率超過300萬倍，而光學(xué)顯微鏡的最大放大倍率約為2000倍，所以通過電子顯微鏡就能直接觀察到某些重金屬的原子和晶體中排列整齊的原子點(diǎn)陣?！ ?/p>
修理維護(hù)
■顯微鏡的維護(hù)
1、經(jīng)常性的維護(hù)
（1）防潮如果室內(nèi)潮濕，光學(xué)鏡片就容易生霉、生霧。鏡片一旦生霉，很難除去。顯微鏡內(nèi)部的鏡片由于不便擦拭，潮濕對其危害性更大。機(jī)械零件受潮后，容易生銹。為了防潮，存放顯微鏡時(shí)，除了選擇干燥的房間外，存放地點(diǎn)也應(yīng)離墻、離地、遠(yuǎn)離濕源。顯微鏡箱內(nèi)應(yīng)放置1～2袋硅膠作干燥劑。并經(jīng)常對硅膠進(jìn)行烘烤。在其顏色變粉紅后，應(yīng)及時(shí)烘烤，烘烤后再繼續(xù)使用。
（2）防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線通過，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放大后，會生成很大的污斑，影響觀察?；覊m、砂粒落入機(jī)械部分，還會增加磨損，引起運(yùn)動受阻，危害同樣很大。因此，必須經(jīng)常保持顯微鏡的清潔。
（3）防腐蝕 顯微鏡不能和具有腐蝕性的化學(xué)試劑放在一起。如硫酸、鹽酸、強(qiáng)堿等。
（4）防熱 防熱的目的主要是為了避免熱脹冷縮引起鏡片的開膠與脫落。
2、光學(xué)系統(tǒng)的擦拭
平時(shí)對顯微鏡的各光學(xué)部分的表面，用干凈的毛筆清掃或用擦鏡紙擦拭干凈即行。在鏡片上有抹不掉的污物、油漬或手指印時(shí)，鏡片生霉、生霧以及長期停用后復(fù)用時(shí)，都需要先進(jìn)行擦拭再使用。
（1）擦拭范圍 目鏡和聚光鏡允許拆開擦拭。物鏡因結(jié)構(gòu)復(fù)雜，裝配時(shí)又要專門的儀器來校正才能恢復(fù)原有的精度，故嚴(yán)禁拆開擦拭。
拆卸目鏡和聚光鏡時(shí)，要注意以下幾點(diǎn)：
a、小心謹(jǐn)慎。
b、拆卸時(shí)，要標(biāo)記各元件的相對位置（可在外殼上劃線作標(biāo)記）、相對順序和鏡片的正反面，以防重裝時(shí)弄錯。
c、操作環(huán)境應(yīng)保持清潔、干燥。拆卸目鏡時(shí)，只要從兩端旋出上下兩塊透鏡即可。目鏡內(nèi)的視場光欄不能移動。否則，會使視場界線模糊。聚光鏡旋開后嚴(yán)禁進(jìn)一步分解其上透鏡。因其上透鏡是油浸的，出廠時(shí)經(jīng)過良好的密封，再分解會破壞它的密封性能而損壞。
2．擦拭方法先用干凈的毛筆或吹風(fēng)球除去鏡片表面的灰塵。然后用干凈的絨布從鏡片中心開始向邊緣作螺旋形單向運(yùn)動。擦完一次把絨布換一個(gè)地方再擦，直至擦凈為止。如果鏡片上有油漬、污物或指印等擦不掉時(shí)，可用柳枝條裹上脫脂棉，蘸少量酒精和乙醚混合液（酒精80％，乙醚20％）擦拭。如果有較重的霉點(diǎn)或霉斑無法除去時(shí)，可用棉簽蘸水潤濕后粘上碳酸鈣粉（含量為99％以上）進(jìn)行擦拭。擦拭后，應(yīng)將粉末清除干凈。鏡片是否擦凈，可用鏡片上的反射光線進(jìn)行觀察檢查。要注意的是，擦拭前一定要將灰塵除凈。否則，灰塵中的砂粒會將鏡面劃起溝紋。不準(zhǔn)用毛巾、手帕、衣服等去擦拭鏡片。酒精乙醚混合液不可用的太多，以免液體進(jìn)入鏡片的粘接部使鏡片脫膠。鏡片表面有一層紫藍(lán)色的透光膜，不要誤作污物將其擦去。
3、機(jī)械部分的擦拭
表面涂漆部分，可用布擦拭。但不能使用酒精、乙醚等有機(jī)溶劑擦，以免脫漆。沒有涂漆的部分若有銹，可用布蘸汽油擦去。擦凈后重新上好防護(hù)油脂即可。
■機(jī)械裝置故障的排除
1、粗調(diào)部分故障的排除
粗調(diào)的主要故障是自動下滑或升降時(shí)松緊不一。所謂自動下滑是指鏡筒、鏡臂或載物臺靜止在某一位置時(shí)，不經(jīng)調(diào)節(jié)，在它本身重量的作用下，自動地慢慢落下來的現(xiàn)象。其原因是鏡筒、鏡臂、載物臺本身的重力大于靜摩擦力引起的。解決的辦法是增大靜摩擦力，使之大于鏡筒或鏡臂本身的重力。
對于斜筒及大部分雙目顯微鏡的粗調(diào)機(jī)構(gòu)來說，當(dāng)鏡臂自動下滑時(shí)，可用兩手分別握往粗調(diào)手輪內(nèi)側(cè)的止滑輪，雙手均按順時(shí)針方向用力擰緊，即可制止下滑。如不湊效，則應(yīng)找專業(yè)人員進(jìn)行修理。
鏡筒自動下滑，往往給人以錯覺，誤認(rèn)為是齒輪與齒條配合的太松引起的。于是就在齒條下加墊片。這樣，鏡筒的下滑雖然能暫時(shí)止住，但卻使齒輪和齒條處于不正常的咬合狀態(tài)。運(yùn)動的結(jié)果，使得齒輪和齒條都變形。尤其是墊得不平時(shí)，齒條的變形更厲害，結(jié)果是一部分咬得緊，一部分咬得松。因此，這種方法不宜采用。
此外，由于粗調(diào)機(jī)構(gòu)長久失修，潤滑油干枯，升降時(shí)會產(chǎn)生不舒服的感覺，甚至可以聽到機(jī)件的摩擦聲。這時(shí)，可將機(jī)械裝置拆下清洗，上油脂后重新裝配。
2、微調(diào)部分故障的排除
微調(diào)部分最常見的故障是卡死與失效。微調(diào)部分安裝在儀器內(nèi)部，其機(jī)械零件細(xì)小、緊湊，是顯微鏡中最精細(xì)復(fù)雜的部分。微調(diào)部分的故障應(yīng)由專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行修理。沒有足夠的把握，不要隨便亂拆。
3、物鏡轉(zhuǎn)換器故障的排除
物鏡轉(zhuǎn)換器的主要故障是定位裝置失靈。一般是定位彈簧片損壞（變形、斷裂、失去彈性、彈簧片的固定螺釘松動等）所致,更換新彈簧片時(shí)，暫不要把固定螺釘旋緊，應(yīng)按本節(jié)“三（二）2”先作光軸校正。等合軸以后，再旋緊螺絲。若是內(nèi)定位式的轉(zhuǎn)換器，則應(yīng)旋下轉(zhuǎn)動盤中央的大頭螺釘，取下轉(zhuǎn)動盤，才能更換定位彈簧片，光軸校正的方法與前面相同。
4、聚光器升降機(jī)構(gòu)故障的排除
這部分的主要故障也是自動下滑。排除方法如下：
（1）直筒顯微鏡聚光器的升降機(jī)構(gòu)如圖10-3-2所示：1. 5.賽璐珞墊圈 2.大頭螺釘 3.偏心式齒桿套 4.齒桿 6.升降手輪 7.雙眼螺母
調(diào)整時(shí),一只手用雙眼螺母扳手插入手輪端面上的雙眼螺母內(nèi)，另一只手用螺絲刀插入另一端的大頭螺釘槽口內(nèi)，用力旋緊即可制止下滑。
（2）斜筒顯微鏡聚光器的升降機(jī)構(gòu)如圖10-3-3所示：
調(diào)整時(shí)，首先用螺絲刀把雙眼螺母中間的駐螺2退出1～2圈，軸承墊圈3是與駐螺2壓緊配合的，因此，也會跟著它一起退出，并脫離齒桿10的端面。然后，用雙眼螺母扳手把雙眼螺母1向調(diào)節(jié)座5旋進(jìn)。同時(shí)，用另一只手轉(zhuǎn)動手輪，進(jìn)行試驗(yàn)，直到升降機(jī)構(gòu)松緊合適，又能停留在任意位置上時(shí)，才停止雙眼螺母的旋進(jìn)。最后，再把駐螺旋入，使軸承墊圈接觸齒桿10就行了。
這樣調(diào)整之所以能夠排除故障，是因?yàn)檎{(diào)節(jié)座5的內(nèi)孔是錐形的。錐形軸套4在軸向有槽口，如圖10-3-4所示。當(dāng)雙眼螺母1向里旋進(jìn)時(shí)，將錐形套向里頂，使錐形套在前進(jìn)時(shí)，槽口變小，內(nèi)孔收縮，將齒桿10夾得更緊，加大了齒輪轉(zhuǎn)動的摩擦阻力，從而制止自動下降。
生物顯微鏡常見故障的排除
一、 常見故障的排除
1.鏡筒的自行下滑:這是生物顯微鏡經(jīng)常發(fā)生的故障之一。對于軸套式結(jié)構(gòu)的顯微鏡解決的辦法可分兩步進(jìn)行。
第一步:用雙手分別握住兩個(gè)粗調(diào)手輪,相對用力旋緊?？茨芊窠鉀Q問題,若還不能解決問題,則要用專用的雙柱板手把一個(gè)粗調(diào)手輪旋下,加一片摩擦片,手輪擰緊后,如果轉(zhuǎn)動很費(fèi)勁,則加的摩擦片太厚了,可調(diào)換一片薄的。以手輪轉(zhuǎn)動不費(fèi)力,鏡筒上下移動輕松,而又不自行下滑為準(zhǔn)。摩擦片可用廢照相底片和小于1毫米厚的軟塑料片用打孔器沖制。
第二步:檢查粗調(diào)手輪軸上的齒輪與鏡筒身上的齒條嚙合狀態(tài)。鏡筒的上下移動是由齒輪帶動齒條來完成的。齒輪與齒條的最佳嚙合狀態(tài)在理論上講是齒條的分度線與齒輪的分度圓相切。在這種狀態(tài)下,齒輪轉(zhuǎn)動輕松,并且對齒條的磨損最些現(xiàn)在有一種錯誤的做法,就是在齒條后加墊片,使齒條緊緊地壓住齒輪來阻止鏡筒的下滑。這時(shí)齒條的分度線與齒輪的分度圓相交,齒輪和齒條的齒尖都緊緊地頂住對方的齒根。當(dāng)齒輪轉(zhuǎn)動時(shí),相互間會產(chǎn)生嚴(yán)重的磨削。由于齒條是銅質(zhì)材料的,齒輪是鋼質(zhì)材料的。所以相互間的磨削,會把齒條上的牙齒磨損壞,齒輪和齒條上會產(chǎn)生許多銅屑。最后齒條會嚴(yán)重磨損而無法使用。因此千萬不能用墊高齒條來阻止鏡筒下滑。解決鏡筒自行下滑的問題,只能用加大粗調(diào)手輪和偏心軸套間的摩擦力來實(shí)現(xiàn)。但有一種情況例外,那就是齒條的分度線與齒輪的分度圓相離。這時(shí)轉(zhuǎn)動粗調(diào)手輪時(shí),同樣會產(chǎn)生空轉(zhuǎn)打滑的現(xiàn)象,影響鏡筒的上下移動。如果這通過調(diào)整粗調(diào)手輪的偏心軸套,無法調(diào)整齒輪與齒條的嚙合距離。則只能在齒條后加墊適當(dāng)?shù)谋∑瑏斫鉀Q。加墊片調(diào)整好齒輪與齒條嚙合距離的標(biāo)準(zhǔn)是:轉(zhuǎn)動粗調(diào)手輪不費(fèi)勁,但也不空轉(zhuǎn)。
調(diào)整好距離后,在齒輪與齒條間加一些中性潤滑脂。讓鏡筒上下移動幾下即可以了。最后還須把偏心軸套上的兩只壓緊螺絲旋緊。不然的話,轉(zhuǎn)動粗調(diào)手輪時(shí),偏心軸套可能會跟著轉(zhuǎn)動,而把齒條卡死,使鏡簡無法上下移動。這時(shí)如果轉(zhuǎn)動粗調(diào)手輪力量過大的話,可能會損壞齒條和偏心軸套。在旋緊壓緊螺絲后,如果發(fā)現(xiàn)偏心軸套還是跟著轉(zhuǎn)的話。這是由于壓緊螺絲的螺絲孔螺紋沒有改好所造成的。因?yàn)閺S家改螺紋是用機(jī)器改絲的,往往會有一到二牙螺紋沒改到位。這時(shí)即使壓緊螺絲也旋不到位,偏心軸套也就壓不緊了。發(fā)現(xiàn)這種故障,只要用M3的絲攻把螺絲孔的螺紋攻穿就能解決問題。我用此方法徹底解決了我校30臺生物顯微鏡偏心軸套跟轉(zhuǎn)的問題。
把以上這些步驟都一一做好后,鏡筒自行下滑問題基本上是徹底解決了。
2.遮光器定位失靈:這可能是遮光器固定螺絲太松,定位彈珠逃出定位孔造成。只要把彈珠放回定位孔內(nèi),旋緊固定螺絲就行了。如果旋緊后,遮光器轉(zhuǎn)動困難,則需在遮光板與載物臺間加一個(gè)墊圈。墊圈的厚薄以螺絲旋緊后,遮光器轉(zhuǎn)動輕松,定位彈珠不外逃,遮光器定位正確為佳。
3、物鏡轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)動困難或定位失靈:轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)動困難可能是固定螺絲太緊。使轉(zhuǎn)動困難,并會損壞零件。太松,里面的軸承彈珠就會脫離軌道,擠在一起,同樣使轉(zhuǎn)動困難；另外彈珠很可能跑到外面來,彈珠的直徑僅有一毫米,很容易遺失。固定螺絲的松緊程度以轉(zhuǎn)換器在轉(zhuǎn)動時(shí)輕松自如,垂直方向沒有松動的間隙為準(zhǔn)。調(diào)整好固定螺絲后,應(yīng)隨即把鎖定螺絲鎖緊。不然的話,轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)動后,又會發(fā)生問題。
轉(zhuǎn)換器定位失靈有時(shí)可能是定位簧片斷裂或彈性變形而造成。一般只要更換簧片就行了。
4.目鏡、物鏡的鏡片被污染或霉變:大部分顯微鏡使用一段時(shí)間后都會產(chǎn)生鏡片的外面被沾污或發(fā)生霉變。尤其是高倍物鏡40X ,在做《觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原》實(shí)驗(yàn)時(shí),極容易被糖液污染。如鏡頭被污染不及時(shí)清洗干凈就會發(fā)生霉變。處理的辦法是先用干凈柔軟的綢布蘸溫水清洗掉糖液等污染物,后用干綢布擦干,再用長纖維脫脂棉蘸些鏡頭清洗液清洗,最后用吹風(fēng)球吹干。要注意的是清洗液千萬不能滲入到物鏡鏡片內(nèi)部。因?yàn)闉榱诉_(dá)到所需要的放大倍數(shù),高倍物鏡的鏡片,需要緊緊地膠接在一起。膠是透明的,且非常暴一旦這層膠被酒精、乙醚等溶劑溶解后,光線通過這兩片鏡片時(shí),光路就會發(fā)生變化。觀察效果會受到很大影響。所以在清洗時(shí)不要讓酒精、乙醚等溶劑滲入到物鏡鏡片的內(nèi)部。
5.鏡架、鏡臀傾斜時(shí)固定不住:這是鏡架和底座的連接螺絲松動所致?？捎脤Ｓ玫碾p頭板手或用尖咀鉗卡住雙眼螺母的兩個(gè)孔眼用力旋緊即可。如旋緊后不解決問題,則需在螺母里加墊適當(dāng)?shù)膲|片來解決。
若是目鏡、物鏡鏡頭內(nèi)部的鏡片被污染或霉變,就必須拆開清洗。目鏡可直接擰開拆下后進(jìn)行清洗。但物鏡的結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,鏡片的疊放,各鏡片間的距離都有非常嚴(yán)格的要求,精度也很高。生產(chǎn)廠家在裝配時(shí)是經(jīng)過精確校正而定位的。所以拆開清洗干凈后,必須嚴(yán)格按原樣裝配好。
生物顯微鏡的鏡片都是用精密加工過的光學(xué)玻璃片制成的,為了增加透光率,都需在光學(xué)玻璃片的兩面涂上一層很薄的透光膜。這樣透光率就可以達(dá)到97％— 98％。這一層透光膜表面很平整光滑,且很薄,一旦透光膜表面被擦傷留有痕跡,它的透光率就會受到很大影響。觀察時(shí)會變得模糊不清。所以在擦拭鏡片時(shí),一定要用干凈柔軟的綢布或干凈毛筆輕輕擦拭,若用擦鏡紙擦拭則更要輕輕擦拭,以免損傷透光膜?！ ?/p>
使用方法
■低倍鏡的使用方法
（1）取鏡和放置：顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中，用時(shí)從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺上，鏡座后端距桌邊7厘米為宜，便于操作。
（2）對光：用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動)，使低倍鏡對準(zhǔn)鏡臺的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時(shí)，說明物鏡光軸已對準(zhǔn)鏡筒中心)。調(diào)節(jié)為較大光圈并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡偏轉(zhuǎn)角度，直到視野內(nèi)出現(xiàn)明亮光斑為止。
（3）放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用壓片夾夾住，然后移動玻片，將所要觀察的部位調(diào)到視野范圍內(nèi)。
（4）調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時(shí)針方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩慢地下降至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在下降鏡筒時(shí)，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡筒下降，以免下降過多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時(shí)睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時(shí)針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心，可移動玻片，將所要觀察的部位調(diào)到視野范圍內(nèi)。(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過調(diào)整光圈的大小來調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí)，鏡臺下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象，說明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺。
■高倍鏡的使用方法
（1）選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。
（2）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。
（3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)
如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，必須順時(shí)針(切勿轉(zhuǎn)錯方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降，方可取下玻片標(biāo)本。
想讓像變大就要使物鏡靠近物體,目鏡遠(yuǎn)離物鏡一些，像變小則反之。
注意事項(xiàng)
■持鏡時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。
■輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實(shí)驗(yàn)臺的邊緣，應(yīng)放在距邊緣10cm處，以免碰翻落地。
■保持顯微鏡的清潔，光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機(jī)械部分用布擦拭。
■水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺，如果沾污應(yīng)立即用擦鏡紙擦凈。
■放置玻片標(biāo)本時(shí)要對準(zhǔn)通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。
■要養(yǎng)成兩眼同時(shí)睜開觀察的習(xí)慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。
■不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。
■使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)，其步驟是：取下標(biāo)本片，轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔，下降鏡臺，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實(shí)驗(yàn)臺柜內(nèi)。最后填寫使用登記表。(注：反光鏡通常應(yīng)垂直放，但有時(shí)因集光器沒提至應(yīng)有高度，鏡臺下降時(shí)會碰壞光圈，所以這里改為平放)
儀器分類
顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。
■光學(xué)顯微鏡
它是在1590年由荷蘭的楊森父子所首創(chuàng)?，F(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡可把物體放大1500倍，分辨的最小極限達(dá)0.2微米。光學(xué)顯微鏡的種類很多，除一般的外，主要有暗視野顯微鏡一種具有暗視野聚光鏡，從而使照明的光束不從中央部分射入，而從四周射向標(biāo)本的顯微鏡.熒光顯微鏡以紫外線為光源，使被照射的物體發(fā)出熒光的顯微鏡?！ ?/p>
■電子顯微鏡
電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點(diǎn)的最小間距來表示。20世紀(jì)70年代，透射式電子顯微鏡的分辨率約為0.3納米(人眼的分辨本領(lǐng)約為0.1毫米)?，F(xiàn)在電子顯微鏡最大放大倍率超過300萬倍，而光學(xué)顯微鏡的最大放大倍率約為2000倍，所以通過電子顯微鏡就能直接觀察到某些重金屬的原子和晶體中排列整齊的原子點(diǎn)陣。
1931年，德國的M.諾爾和E.魯斯卡，用冷陰極放電電子源和三個(gè)電子透鏡改裝了一臺高壓示波器，并獲得了放大十幾倍的圖象，發(fā)明的是透射電鏡，證實(shí)了電子顯微鏡放大成像的可能性。1932年，經(jīng)過魯斯卡的改進(jìn)，電子顯微鏡的分辨能力達(dá)到了50納米，約為當(dāng)時(shí)光學(xué)顯微鏡分辨本領(lǐng)的十倍，突破了光學(xué)顯微鏡分辨極限，于是電子顯微鏡開始受到人們的重視。
到了二十世紀(jì)40年代，美國的希爾用消像散器補(bǔ)償電子透鏡的旋轉(zhuǎn)不對稱性，使電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)有了新的突破，逐步達(dá)到了現(xiàn)代水平。在中國，1958年研制成功透射式電子顯微鏡，其分辨本領(lǐng)為3納米，1979年又制成分辨本領(lǐng)為0.3納米的大型電子顯微鏡。
電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)雖已遠(yuǎn)勝于光學(xué)顯微鏡，但電子顯微鏡因需在真空條件下工作，所以很難觀察活的生物，而且電子束的照射也會使生物樣品受到輻照損傷。其他的問題，如電子槍亮度和電子透鏡質(zhì)量的提高等問題也有待繼續(xù)研究。
■掃描隧道顯微鏡
掃描隧道顯微鏡亦稱為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”，是一種利用量子理論中的隧道效應(yīng)探測物質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的儀器。它于1981年由格爾德.賓寧（G．Binning）及海因里希.羅雷爾（H．Rohrer）在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實(shí)驗(yàn)室發(fā)明，兩位發(fā)明者因此與恩斯特.魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學(xué)獎。
它作為一種掃描探針顯微術(shù)工具，掃描隧道顯微鏡可以讓科學(xué)家觀察和定位單個(gè)原子，它具有比它的同類原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外，掃描隧道顯微鏡在低溫下（4K）可以利用探針尖端精確操縱原子，因此它在納米科技既是重要的測量工具又是加工工具。
STM使人類第一次能夠?qū)崟r(shí)地觀察單個(gè)原子在物質(zhì)表面的排列狀態(tài)和與表面電子行為有關(guān)的物化性質(zhì)，在表面科學(xué)、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究中有著重大的意義和廣泛的應(yīng)用前景，被國際科學(xué)界公認(rèn)為20世紀(jì)80年代世界十大科技成就之一。
中國首屆共聚焦圖像大賽
大賽介紹
中國首屆共聚焦圖像大賽，啟動于2009年11月1日，到2010年1月20日圓滿結(jié)束。此次“奧林巴斯杯”全國首屆共聚焦顯微鏡成像大賽在北京舉行。本次大賽由科學(xué)網(wǎng)主辦，奧林巴斯（中國）有限公司獨(dú)家冠名贊助，有來自中國生命科學(xué)領(lǐng)域的專家擔(dān)任評委的賽事。旨在推動中國科研人員顯微成像技術(shù)的不斷提高，促進(jìn)共聚焦成像技術(shù)在前沿科研領(lǐng)域的應(yīng)用，加強(qiáng)科研人員之間的交流與合作。
部分獲獎作品
一等獎作品：
作品簡介：本圖展示在活體斑馬魚樣本(in vivo)中,腦部的神經(jīng)元（綠色）以及為神經(jīng)元供養(yǎng)的血管（紅色）,可以清晰看出腦部不同腦區(qū)結(jié)構(gòu)(例如中腦的視頂蓋和胞體層).明場勾勒出活體斑馬魚的腦部構(gòu)造。
二等獎作品：
《盛放的腫瘤》
作品簡介：
在果蠅一齡幼蟲的單個(gè)神經(jīng)干細(xì)胞中過表達(dá)基因X，到了三齡幼蟲時(shí)這一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過無數(shù)次分裂，造成神經(jīng)干細(xì)胞的過度增生，形成神經(jīng)干細(xì)胞腫瘤。綠色為GFP顯示在此位置X基因被過表達(dá)，藍(lán)色為果蠅神經(jīng)干細(xì)胞特異的標(biāo)記，紅色顯示每一個(gè)細(xì)胞的輪廓。
三等獎作品：
《鳳舞九天》
作品簡介：
本圖為果蠅卵巢免疫熒光染色結(jié)果，由卵巢末端的germarium和其后連接的4個(gè)egg chamber組成。藍(lán)色DAPI染料標(biāo)記了egg chamber中正在發(fā)育的生殖細(xì)胞，紅色標(biāo)記了細(xì)胞骨架中的Hts蛋白，在egg chamber表面的卵泡細(xì)胞中有表達(dá)，綠色標(biāo)記了核膜上表達(dá)的LaminC蛋白。該圖展示了germarium中生殖干細(xì)胞的分布及其niche,對于我們研究干細(xì)胞的繁殖和分化調(diào)節(jié)有著重要作用
儀器的歷史
早在公元前一世紀(jì)，人們就已發(fā)現(xiàn)通過球形透明物體去觀察微小物體時(shí)，可以使其放大成像。后來逐漸對球形玻璃表面能使物體放大成像的規(guī)律有了認(rèn)識。
1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。
1611年
Kepler(克卜勒)：提議復(fù)合式顯微鏡的制作方式。
1665年
Hooke(胡克)：「細(xì)胞」名詞的由來便由虎克利用復(fù)合式顯微鏡觀察植物的木栓組織上的微小氣孔而得來的。
1674年
Leeuwenhoek(列文胡克)：發(fā)現(xiàn)原生動物學(xué)的報(bào)導(dǎo)問世，并于九年后成為首位發(fā)現(xiàn)「細(xì)菌」存在的人。
1833年
Brown(布朗)：在顯微鏡下觀察紫羅蘭，隨后發(fā)表他對細(xì)胞核的詳細(xì)論述。
1838年
Schlieden and Schwann(施萊登和施旺)：皆提倡細(xì)胞學(xué)原理，其主旨即為「有核細(xì)胞是所有動植物的組織及功能之基本元素」。
1857年
Kolliker(寇利克)：發(fā)現(xiàn)肌肉細(xì)胞中之線粒體。
1876年
Abbe(阿比)：剖析影像在顯微鏡中成像時(shí)所產(chǎn)生的繞射作用，試圖設(shè)計(jì)出最理想的顯微鏡。
1879年
Flrmming(佛萊明)：發(fā)現(xiàn)了當(dāng)動物細(xì)胞在進(jìn)行有絲分裂時(shí)，其染色體的活動是清晰可見的。
1881年
Retziue(芮祖)：動物組織報(bào)告問世，此項(xiàng)發(fā)表在當(dāng)世尚無人能凌駕逾越。然而在20年后，卻有以Cajal(卡嘉爾)為首的一群組織學(xué)家發(fā)展出顯微鏡染色觀察法，此舉為日后的顯微解剖學(xué)立下了基礎(chǔ)。
1882年
Koch(寇克)：利用苯安染料將微生物組織進(jìn)行染色，由此他發(fā)現(xiàn)了霍亂及結(jié)核桿菌。往后20年間，其它的細(xì)菌學(xué)家，像是Klebs and Pasteur(克萊柏和帕斯特)則是藉由顯微鏡下檢視染色藥品而證實(shí)許多疾病的病因。
1886年
Zeiss(蔡氏)：打破一般可見光理論上的極限，他的發(fā)明--阿比式及其它一系列的鏡頭為顯微學(xué)者另辟一新的解像天地。
1898年
Golgi(高爾基)：首位發(fā)現(xiàn)細(xì)菌中高爾基體的顯微學(xué)家。他將細(xì)胞用硝酸銀染色而成就了人類細(xì)胞研究上的一大步。
1924年
Lacassagne(蘭卡辛)：與其實(shí)驗(yàn)工作伙伴共同發(fā)展出放射線照相法，這項(xiàng)發(fā)明便是利用放射性釙元素來探查生物標(biāo)本。
1930年
Lebedeff(萊比戴衛(wèi))：設(shè)計(jì)并搭配第一架干涉顯微鏡。另外由Zernicke(卓尼柯)在1932年發(fā)明出相位差顯微鏡，兩人將傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡延伸發(fā)展出來的相位差觀察使生物學(xué)家得以觀察染色活細(xì)胞上的種種細(xì)節(jié)。
1941年
Coons(昆氏)：將抗體加上螢光染劑用以偵測細(xì)胞抗原。
1952年
Nomarski(諾馬斯基)：發(fā)明干涉相位差光學(xué)系統(tǒng)。此項(xiàng)發(fā)明不僅享有專利權(quán)并以發(fā)明者本人命名之。
1981年
Allen and Inoue(艾倫及艾紐)：將光學(xué)顯微原理上的影像增強(qiáng)對比，發(fā)展趨于完美境界。
1988年
Confocal(共軛焦)掃描顯微鏡在市場上被廣為使用?！ ?/p>
幾種特殊顯微鏡簡介
■暗視野顯微鏡
暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統(tǒng)，無物體時(shí)，視野暗黑，不可能觀察到任何物體，當(dāng)有物體時(shí)，以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。在暗視野觀察物體，照明光大部分被折回，由于物體(標(biāo)本)所在的位置結(jié)構(gòu)，厚度不同，光的散射性，折光等都有很大的變化。
■相位差顯微鏡
相位差顯微鏡的結(jié)構(gòu)：
相位差顯微鏡，是應(yīng)用相位差法的顯微鏡。因此，比通常的顯微鏡要增加下列附件：
(1) 裝有相位板(相位環(huán)形板)的物鏡，相位差物鏡。
(2) 附有相位環(huán)(環(huán)形縫板)的聚光鏡，相位差聚光鏡。
(3) 單色濾光鏡-(綠)。
各種元件的性能說明
(1) 相位板使直接光的相位移動 90°，并且吸收減弱光的強(qiáng)度，在物鏡后焦平面的適當(dāng)位置裝置相位板，相位板必須確保亮度，為使衍射光的影響少一些，相位板做成環(huán)形狀。
(2) 相位環(huán)(環(huán)狀光圈)是根據(jù)每種物鏡的倍率，而有大小不同，可用轉(zhuǎn)盤器更換。
(3) 單色濾光鏡系用中心波長546nm(毫微米)的綠色濾光鏡。通常是用單色濾光鏡入觀察。相位板用特定的波長，移動90°看直接光的相位。當(dāng)需要特定波長時(shí)，必須選擇適當(dāng)?shù)臑V光鏡，濾光鏡插入后對比度就提高。此外，相位環(huán)形縫的中心，必須調(diào)整到正確方位后方能操作，對中望遠(yuǎn)鏡就是起這個(gè)作用部件。
■視頻顯微鏡
將傳統(tǒng)的顯微鏡與攝象系統(tǒng)，顯示器或者電腦相結(jié)合，達(dá)到對被測物體的放大觀察的目的。
最早的雛形應(yīng)該是相機(jī)型顯微鏡，將顯微鏡下得到的圖像通過小孔成象的原理，投影到感光照片上，從而得到圖片?；蛘咧苯訉⒄障鄼C(jī)與顯微鏡對接，拍攝圖片。隨著CCD攝像機(jī)的興起，顯微鏡可以通過其將實(shí)時(shí)圖像轉(zhuǎn)移到電視機(jī)或者監(jiān)視器上，直接觀察，同時(shí)也可以通過相機(jī)拍攝。80年代中期，隨著數(shù)碼產(chǎn)業(yè)以及電腦業(yè)的發(fā)展，顯微鏡的功能也通過它們得到提升，使其向著更簡便更容易操作的方面發(fā)展。到了90年代末，半導(dǎo)體行業(yè)的發(fā)展，晶圓要求顯微鏡可以帶來更加配合的功能，硬件與軟件的結(jié)合，智能化，人性化，使顯微鏡在工業(yè)上有了更大的發(fā)展。
■熒光顯微鏡
在螢光顯微鏡上，必須在標(biāo)本的照明光中，選擇出特定波長的激發(fā)光，以產(chǎn)生螢光，然后必須在激發(fā)光和螢光混合的光線中，單把螢光分離出來以供觀察。因此，在選擇特定波長中，濾光鏡系統(tǒng)，成為極其重要的角色。
螢光顯微鏡原理：
(A) 光源：光源幅射出各種波長的光(以紫外至紅外)。
(B) 激勵濾光源：透過能使標(biāo)本產(chǎn)生螢光的特定波長的光，同時(shí)阻擋對激發(fā)螢光無用的光。
(C) 螢光標(biāo)本：一般用螢光色素染色。
(D) 阻擋濾光鏡：阻擋掉沒有被標(biāo)本吸收的激發(fā)光有選擇地透射螢光，在螢光中也有部分波長被選擇透過。
偏光顯微鏡是用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。凡具有雙折射的物質(zhì)，在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚，當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色法來進(jìn)行觀察，但有些則不可能，而必須利用偏光顯微鏡。
（1）偏光顯微鏡的特點(diǎn)
將普通光改變?yōu)槠窆膺M(jìn)行鏡檢的方法，以鑒別某一物質(zhì)是單折射（各向同行）或雙折射性（各向異性）。雙折射性是晶體的基本特性。因此，偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域，在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。
（2）偏光顯微鏡的基本原理
偏光顯微鏡的原理比較復(fù)雜，在此不作過多介紹,偏光顯微鏡必須具備以下附件：起偏鏡，檢偏鏡，補(bǔ)償器或相位片，專用無應(yīng)力物鏡，旋轉(zhuǎn)載物臺。
■超聲波顯微鏡
超聲波掃描顯微鏡的特點(diǎn)在于能夠精確的反映出聲波和微小樣品的彈性介質(zhì)之間的相互作用，并對從樣品內(nèi)部反饋回來的信號進(jìn)行分析！圖像上（C-Scan）的每一個(gè)象素對應(yīng)著從樣品內(nèi)某一特定深度的一個(gè)維空間坐標(biāo)點(diǎn)上的信號反饋，具有良好聚焦功能的Z.A傳感器同時(shí)能夠發(fā)射和接收聲波信號。一副完整的圖像就是這樣逐點(diǎn)逐行對樣品掃描而成的。反射回來的超聲波被附加了一個(gè)正的或負(fù)的振幅，這樣就可以用信號傳輸?shù)臅r(shí)間反映樣品的深度。用戶屏幕上的數(shù)字波形展示出接收到的反饋信息（A-Scan）。設(shè)置相應(yīng)的門電路，用這種定量的時(shí)間差測量（反饋時(shí)間顯示），就可以選擇您所要觀察的樣品深度。
解剖顯微鏡，又被稱為實(shí)體顯微鏡或立體顯微鏡，是為了不同的工作需求所設(shè)計(jì)的顯微鏡。利用解剖顯微鏡觀察時(shí)，進(jìn)入兩眼的光各來自一個(gè)獨(dú)立的路徑，這兩個(gè)路徑只夾一個(gè)小小的角度，因此在觀察時(shí)，樣品可以呈現(xiàn)立體的樣貌。解剖顯微鏡的光路設(shè)計(jì)有兩種： The Greenough Concept和The Telescope Concept。解剖顯微鏡常常用在一些固體樣本的表面觀察，或是解剖、鐘表制作和小電路板檢查等工作上。
■共聚焦顯微鏡
從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上，如果物體恰在焦點(diǎn)上，那么反射光通過原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源，這就是所謂的共聚焦，簡稱共焦。共焦顯微鏡[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror)，將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向，在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔(Pinhole)，小孔就位于焦點(diǎn)處，擋板后面是一個(gè) 光電倍增管(photomultiplier tube，PMT)?？梢韵胂瘢綔y光焦點(diǎn)前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng)，必不能聚焦到小孔上，會被擋板擋住。于是光度計(jì)測量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。其意義是：通過移動透鏡系統(tǒng)可以對一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。
■醫(yī)學(xué)和生物學(xué)常使用的光學(xué)顯微鏡
有下列12種：
暗視野顯微鏡 在普通光學(xué)顯微鏡臺下配一個(gè)暗視野聚光器（圖4）,來自下面光源的光線被拋物面聚光器反射，形成了橫過顯微鏡視野而不進(jìn)入物鏡的強(qiáng)烈光束。因此視野是暗的，視野中直徑大于 0.3m的微粒將光線散射，其大小和形態(tài)可清楚看到。甚至可看到普通明視野顯微鏡中看不見的幾個(gè)毫微米的微粒。因此在某些細(xì)菌、細(xì)胞等活體檢查中常常使用。
■場發(fā)射掃描電子顯微鏡
主要用途： 該儀器具有超高分辨率，能做各種固態(tài)樣品表面形貌的二次電子象、反射電子象觀察及圖像處理。 具有高性能x射線能譜儀，能同時(shí)進(jìn)行樣品表層的微區(qū)點(diǎn)線面元素的定性、半定量及定量分析，具有形貌、化學(xué)組分綜合分析能力。
儀器類別： 03040702 /儀器儀表 /光學(xué)儀器 /電子光學(xué)及離子光學(xué)儀器
指標(biāo)信息： 二次電子象分辨率：1.5nm 加速電壓：0～30kV 放大倍數(shù)：10-50萬倍連續(xù)可調(diào)工作距離：5～35mm連續(xù)可調(diào)傾斜：-5°～45° x射線能譜儀： 分辨率：133eV 分析范圍：B-U
附件信息： 鍍金鍍炭儀 ISIS圖像處理系統(tǒng)背散射探頭
場發(fā)射掃描電鏡，由于分辨率高，為納米材料的研究提供了可靠的實(shí)驗(yàn)手段。另外，對半導(dǎo)體材料和絕緣體，都能得到滿意的圖像，對超導(dǎo)薄膜，磁性材料，分子束外延生長的薄膜材料，半導(dǎo)體材料進(jìn)行了形貌觀察，并對多種材料進(jìn)行了微區(qū)成份分析，均能得到滿意的結(jié)果
金相顯微鏡參數(shù):
規(guī)格： 1、目鏡管
三目鏡管：傾角30°，眼瞳調(diào)節(jié)范圍 55mm-75mm
2、目鏡：目鏡：10（￠18mm）
3、五孔物鏡轉(zhuǎn)換器（一般四孔）：
PL4X、PL10X、PL20X、PL40X、PL100X（可選購PL60X）
4、載物臺
方臺：150*200mm
移動范圍：15*15mm
5、照明
柯勒照明、6V20W鹵素?zé)?、亮度可調(diào)
產(chǎn)品說明：
1、顯微鏡主體 1臺
2、三目鏡筒 1只
3、物鏡：PL4X、PL10X、PL20X、
PL40X、PL100X 各1只
4、目鏡：10X /18mm 1對
5、載物臺壓簧 1只
6、濾色片 2片
7、載物片：φ10、φ20 各1塊
8、溴鎢燈泡6V20W 2只
9、香柏油 1瓶
10、隨機(jī)文件 1套
可選購配件：
目鏡：12.5X目鏡、10X平場分劃目鏡（ 格值0.1mm）
物鏡測微尺、80X物鏡、50X物鏡
采集卡、適配鏡、圖像分析軟件、打印機(jī)、數(shù)碼相機(jī)、攝像頭
圖像資料：
備注： MC006-5XB-PC金相顯微鏡主要用于鑒定和分析金屬內(nèi)部結(jié)構(gòu)組織，它是金屬學(xué)研究金相的重要儀器，是工業(yè)部門鑒定產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵設(shè)備，該儀器配用攝像裝置，可攝取金相圖譜，并對圖譜進(jìn)行測量分析，對圖象進(jìn)行編輯、輸出、存儲、管理等功能?！ ?/p>
生物顯微鏡(技術(shù)參數(shù))
規(guī)格： 圖象適配鏡：0.44倍
消色差物鏡：4X 10X 40X 100X(油）
廣角目鏡： 10X 16X
聚光鏡： 1.25NA
調(diào)焦范圍： 25mm 微動格值：0.002mm
機(jī)械平臺： 160×140mm
移動范圍： 橫向 70mm 縱向 50mm
光瞳間距： 55-75mm
鹵鎢燈泡： 6v/15w
電源： 220V 50Hz
產(chǎn)品說明：
1、主機(jī) 1臺
2、三目鏡筒 1只
3、消色差物鏡：4X、10X、40X、100X（油） 各1只
4、目鏡：10X、16X 各1對
5、濾色片（蘭、黃、綠） 各1片
6、油鏡油 1瓶
7、備用燈泡6V20W 1只
8、隨機(jī)文件 1套
可選購：
圖象適配鏡
CCD：松下240， 480線
數(shù)碼相機(jī)：索尼W5 500萬像素
索尼W7 700萬像素
圖集卡 CG400
圖像資料:
用途：用于生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、組織學(xué)、藥物化學(xué)等研究工作以及臨床度驗(yàn)之用。具有粗微動同軸的調(diào)焦機(jī)構(gòu)，滾珠內(nèi)定位轉(zhuǎn)換器，亮度可調(diào)的照明裝置，并帶有攝影、攝像接口?！ ?/p>
透反射式偏光顯微鏡
透反射式偏光顯微鏡，隨著光學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，作為光學(xué)儀器的偏光顯微鏡，其應(yīng)用范圍也越來越廣闊，許多行業(yè)，如化工的化學(xué)纖維，半導(dǎo)體工業(yè)以及藥品檢驗(yàn)等等，也廣泛地使用偏光顯微鏡。XPV-213透射偏光顯微鏡就是非常適用的產(chǎn)品，可供廣大用戶作單偏光觀察，正交偏光觀察，錐光觀察以及顯微攝影，配置有石膏λ、云母λ/4試片、石英楔子和移動尺等附件，是一組具有較完備功能和良好品質(zhì)的新型產(chǎn)品.本儀器的具有可擴(kuò)展性，可以接計(jì)算機(jī)和數(shù)碼相機(jī)。對圖片進(jìn)行保存、編輯和打印。
【操作練習(xí)】
一）低倍鏡、高倍鏡的使用練習(xí)
1. 觀察文字或字母裝片：取一片字母裝片，用低倍鏡觀察，反復(fù)練習(xí)對光、調(diào)光、標(biāo)本放置和調(diào)節(jié)焦距等。如將玻片前后左右移動時(shí)，注意物像與玻片移動方向是否一致，玻片上的字母是正像還是反像，為什么?
2. 觀察羊毛片（或頭發(fā)）交叉裝片：取一張毛（發(fā)）交叉裝片，先用低倍鏡觀察，找到兩根毛（發(fā)）后，再將毛（發(fā)）交叉點(diǎn)移到視野中央，然后換高倍鏡觀察，再輕微轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器，觀察不同層次，判定哪條毛（發(fā)）在上方，哪條位于下方。
（二）油鏡的使用練習(xí)
1. 取一張血涂片或取血一小滴，滴于清潔的載玻片一端，另取一張邊緣平整的載玻片，按照圖1-3所示做成血涂片。先用低倍鏡再用高倍鏡進(jìn)行觀察。
圖1-4 蛙血涂片 圖 1-5 運(yùn)動神經(jīng)細(xì)胞
2. 用油鏡觀察，并分辨紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨率。
3. 觀察兔脊神經(jīng)節(jié)切片（示固定染色的細(xì)胞）
取兔脊神經(jīng)節(jié)切片標(biāo)本先在調(diào)好光線的低倍鏡下觀察（固定染色的標(biāo)本需調(diào)較亮光線），低倍鏡下找到要觀察的標(biāo)本，為淡紫色的神經(jīng)節(jié)切面，在其外圍包有被膜，且向內(nèi)伸入，形成神經(jīng)節(jié)的結(jié)締組織支架，節(jié)內(nèi)有許多大小不等的神經(jīng)細(xì)胞，呈散在分布。然后轉(zhuǎn)換高倍鏡，選擇完整而清晰的圓形
圖 1-6感覺神經(jīng)細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞仔細(xì)觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)?？梢姷皆诩?xì)胞中央有一圓形核，核內(nèi)有著色為深紫紅色的圓形核仁及染色質(zhì)顆粒，核與細(xì)胞膜之間是均勻淺紫色的細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞的外面圍有若干個(gè)被囊細(xì)胞，它起保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的作用。在神經(jīng)細(xì)胞之間還可看到有軸索橫斷面和許多神經(jīng)纖維，多呈交錯排列。
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圖1-3血涂片的制備方法
4. 觀察完畢，務(wù)必將油鏡按正確方法擦凈。
【其它幾種顯微鏡簡介】
目前在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，常用的顯微鏡，還有以下幾種：
1. 雙筒解剖顯微鏡：解剖較小標(biāo)本或觀察玻片標(biāo)本的全貌時(shí)，需使用解剖顯微鏡，以觀察自然狀態(tài)下較小的實(shí)體（正像）和較大的玻片標(biāo)本，或解剖細(xì)小生物。
2. 相差顯微鏡：活細(xì)胞在普通光鏡下，一般不能分辨其細(xì)微結(jié)構(gòu)。這是由于各細(xì)微結(jié)構(gòu)的折光性很近似或?qū)Ρ炔粔蝻@著的緣故。相差顯微鏡則是在聚光器下裝一個(gè)環(huán)狀光欄，其物鏡是安有相板的相差物鏡。環(huán)狀光欄的作用是造成空心的光線錐，使直射光和衍射光分離。相板的作用是使直射光和衍射光發(fā)生干涉，導(dǎo)致相位差變成振幅差(即明暗差)，使反差加強(qiáng)。所以，可以觀察活細(xì)胞中不同染色的微細(xì)結(jié)構(gòu)。
3. 倒置顯微鏡：物鏡位于標(biāo)本的下方，而光源位于標(biāo)本的上方。主要用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞的生長情況。
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