基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)/腦脊液顯微鏡檢查

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臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)

體腔液檢查
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［方法學(xué)評(píng)價(jià)］一般工法。細(xì)胞少時(shí)應(yīng)將腦脊液直接灌入FuchsRosenthal計(jì)數(shù)板，總體積為3。6μl中計(jì)當(dāng)選，但愿現(xiàn)用改良牛鮑氏計(jì)數(shù)盤(pán)的誤差更大，所以應(yīng)增加計(jì)數(shù)面積。如果標(biāo)本內(nèi)細(xì)胞較多，可用生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液稀釋后再用人工計(jì)數(shù)，也可用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行計(jì)數(shù)。

當(dāng)穿刺損傷血管導(dǎo)致血性禽脊應(yīng)付或出血性腦血管病時(shí)，計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)已無(wú)意義，白細(xì)胞數(shù)亦須經(jīng)校正辦法有二：①估計(jì)值：即以紅細(xì)胞與白細(xì)胞數(shù)之比為700：1的關(guān)系估計(jì)白細(xì)胞數(shù)。也有學(xué)齡前者認(rèn)為蛛網(wǎng)膜下腔出血的患者在發(fā)病3-4天內(nèi)進(jìn)行腰穿刺時(shí)由于紅細(xì)胞破壞較早，應(yīng)以每500個(gè)紅細(xì)胞比1個(gè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)較為合適。②通過(guò)外周血紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)和腦脊液中紅細(xì)胞計(jì)當(dāng)選出從血液中帶進(jìn)腦脊液中白細(xì)胞數(shù)。以后者較為準(zhǔn)確。

［參考值］成人腦脊液內(nèi)無(wú)紅細(xì)胞，白細(xì)胞極少，其參考范圍：腰池中為（0-10）×10⁶/L；腦室內(nèi)為（0-5）×10⁶/L，兒童為（0-15）×10⁶/L，新生兒為（0-30）×10⁶/L。如白細(xì)胞達(dá)（10-50）×10⁶/L為輕度增加，（50-100）×10⁶/L為中度增加，200×10⁶/L以上顯著增加。

（二）白細(xì)胞分類

［參考值］正常腦脊液中白細(xì)胞主要為單個(gè)核細(xì)胞。多為淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞。偶可見(jiàn)到軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、脈絡(luò)膜細(xì)胞等。

（三）細(xì)胞學(xué)檢查

［方法學(xué)評(píng)價(jià)］一般用腦脊液離心沉渣涂片，經(jīng)瑞特染色后用油鏡分類，但細(xì)胞形成常受影響。為了盡可能多地收集細(xì)胞和保持完好的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，國(guó)內(nèi)一些單位已將細(xì)胞玻片離心沉淀儀運(yùn)用于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查，提高了癌細(xì)胞的檢出率，在細(xì)胞染色技術(shù)上也采用我種方法。目前常用染色方法為MayGnimwaldGiemsa染色法。其客觀存在如吖啶橙熒光染色法適用于于對(duì)瘤細(xì)胞的辨認(rèn)；非特異性酯酶染色法適用腦脊液中T細(xì)胞辨認(rèn)；高碘酸雪夫染色法用以鑒別腺癌細(xì)胞和原淋巴細(xì)胞；過(guò)氧化物酶染色用以鑒別形態(tài)相似的幼稚細(xì)胞；脂類染色法用于鑒別脂類吞噬細(xì)胞；硝基四氮唑染色法用于鑒定成熟和幼稚的中性粒細(xì)胞等。

（四）寄生蟲(chóng)學(xué)檢查

經(jīng)沉淀涂片認(rèn)真尋找蟲(chóng)卵、幼蟲(chóng)等。

（五）顯微鏡檢查的臨床意義

1．中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性關(guān)病此時(shí)腦脊應(yīng)付細(xì)胞病理學(xué)變化分三個(gè)不同時(shí)期：①急性炎性滲出期，呈粒細(xì)胞反應(yīng)；②亞急性增殖期，呈激活淋巴細(xì)胞或單核-巨噬細(xì)胞反應(yīng)；③修復(fù)其呈淋巴細(xì)胞反應(yīng)。化膿性腦膜炎的急性期變化最突出，持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)；此期腦脊液細(xì)胞數(shù)每微升可高達(dá)數(shù)千，經(jīng)中性粒細(xì)胞為產(chǎn)，當(dāng)用抗生素治療后，腦脊液細(xì)胞數(shù)迅速下降。漬毒性腦炎亞急性期出現(xiàn)較早，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，腦脊液中細(xì)胞數(shù)輕度增加，以淋巴細(xì)胞為主，在單純皰疹病毒性腦炎的腦脊液淋巴樣細(xì)胞中可發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)包涵體，結(jié)核性腦膜炎時(shí)其腦脊液細(xì)胞數(shù)可增加，但超過(guò)500×10⁶/L者較為罕見(jiàn)，在發(fā)病初期以中性粒細(xì)胞為主，但很快下降，由于患者多在發(fā)病數(shù)天后才來(lái)診治，因此首次腰穿時(shí)，腦脊液中中性粒細(xì)胞已趨下降而淋巴細(xì)胞為多。粒細(xì)胞、淋巴及漿細(xì)胞同時(shí)存在是結(jié)核性腦膜炎的特點(diǎn)。新型隱球菌性腦膜炎可在腦脊液中直接發(fā)現(xiàn)婚球菌，必要時(shí)用印度墨汁染色予以確診。

2．中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤腦脊液細(xì)胞當(dāng)選可正?；蛏愿?，以淋巴細(xì)胞為主。腦脊液中能否找到腫瘤細(xì)胞取決于腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和采集標(biāo)本的多少。同時(shí)也與檢查者技術(shù)水平有關(guān)，采用細(xì)胞正玻片離心沉淀儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細(xì)胞是白血病腦膜轉(zhuǎn)移的證據(jù)。

3．腦血管病腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查有助于鑒別腦出血或腰穿損傷性出血。前者在早期病后數(shù)小時(shí)可見(jiàn)大量紅細(xì)胞和明顯中性粒細(xì)胞增多，2-3天內(nèi)達(dá)高峰，在腦脊液中可發(fā)現(xiàn)吞噬細(xì)胞，出血后數(shù)小時(shí)至第3天可出現(xiàn)含有紅細(xì)胞的吞噬細(xì)胞，5天后可見(jiàn)含鐵血黃素吞噬細(xì)胞。如為穿刺損傷性出血?jiǎng)t不會(huì)有上述反應(yīng)。

4．腦寄生蟲(chóng)病不僅腦脊液細(xì)胞數(shù)升高，并可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多，約占白細(xì)胞的60%或更高。漿細(xì)胞增多為加一特點(diǎn)。如將腦脊液離心沉淀物全傾倒在玻片上，在顯微鏡下檢查可發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)卵、阿米巴原蟲(chóng)、弓形體、旋毛蟲(chóng)的幼蟲(chóng)等，甚至還可找至細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的頭節(jié)或頭鉤。

5．紅斑狼瘡有時(shí)可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細(xì)胞。

常見(jiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點(diǎn)見(jiàn)表15-2。

表15-2 常見(jiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點(diǎn)

	壓力（kpa）	外觀	蛋白質(zhì) 定性定量g/L	葡萄糖（mmol/L）	氯化物(mmol/L)	細(xì)胞總數(shù)及分類	細(xì)菌
正常人	臥位0.78-1.67	無(wú)色透明	-～±+0.2-0.4	2.5-4.4	120-130	(0-10)×10⁶/L多為淋巴細(xì)胞	無(wú)
化膿性腦膜炎	↑↑↑	混濁有凝塊	2+以上↑+～2+↑	↓↓↓	↓	顯著增加，以中性粒細(xì)胞為主增加，早期以中性粒細(xì)胞為主，其后以淋巴細(xì)胞為主	可發(fā)現(xiàn)至病菌找到抗酸性桿菌或結(jié)核培養(yǎng)陽(yáng)性
結(jié)核性腦膜炎	↑↑↑	毛玻璃樣混濁有薄膜形成	↑+	↓↓	↓↓	增加以淋巴細(xì)胞為主	無(wú)
病毒性腦膜炎流行性乙型腦炎	↑ ↑	清晰或微混清晰或微混	↑+ ↑	正常	正常	增加早期以中性粒細(xì)胞為主期限后以淋巴細(xì)胞為主	無(wú)
新型隱球菌腦膜炎腦室及珠網(wǎng)膜下腔出血腦瘤	↑	清晰或微混	↑	↓	↓	增加以淋巴細(xì)胞為產(chǎn)	新型隱球菌
↑↑	血性	+～2+↑↑	↑	正常	無(wú)	增加以淋巴細(xì)胞為產(chǎn)
					增加以紅細(xì)胞為主

↑↑	清晰	↑+
				正常
腦脊髓	↑	清晰	+↑		正常	增加以淋巴細(xì)胞為主	無(wú)
梅毒					正常	增加以淋巴細(xì)胞為主	無(wú)