細(xì)胞系
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初代培養(yǎng)物開始第一次傳代培養(yǎng)后的細(xì)胞，即稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱之為有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）；已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細(xì)胞系，稱連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系
（InfiniteCellLine）。無限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，有的可能已成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無限細(xì)胞系有的只有永生性（或不死性），但仍保留接觸抑制和無異體接種致癌性；有的不僅有永生性，異體接種也有致瘤性，說明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱該細(xì)胞系的亞系（Subline）?！ ?/p>
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細(xì)胞系-概念分歧
現(xiàn)行的人教社大綱版選修教材中是這樣介紹細(xì)胞株和細(xì)胞系的：
原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機”，不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в?a href="/w/%E7%99%8C%E5%8F%98" title="癌變">癌變的特點，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
在一些別的資料中，細(xì)胞株和細(xì)胞系的概念與我們教材上的說法正好相反。課標(biāo)教材沒有再介紹這一對概念。這又是為什么呢？人教社編輯包春瑩老師（bcying）對這一疑點的解釋：細(xì)胞系和細(xì)胞株，兩者曾一度混用，導(dǎo)致有些文獻(xiàn)中概念不清。下面所指的概念是現(xiàn)在國內(nèi)外比較通用的，也是絕大多數(shù)研究者接受的觀點。
原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功即稱為細(xì)胞系（CellLine），因此細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株（CellStrain），也就是說，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在?！ ?/p>
細(xì)胞系-腫瘤細(xì)胞系
這是現(xiàn)有細(xì)胞系中最多的一類，中國已建細(xì)胞系主要為這類細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性。
對已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱；細(xì)胞的命名無嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫字或代號表示。但不論什么形式，均不宜太長，以便記憶和了解，今別舉以下幾種代表性的細(xì)胞名稱供參考：
CHO：中國地鼠卵巢細(xì)胞（ChineseHamsterOvary）
宮-743：宮頸癌上皮細(xì)胞，1974年3月建立
NIH3T3：美國國立衛(wèi)生研究所（NationalInstituteofHealth）建立；每3天傳代，每次接種3×105細(xì)胞／毫升。
細(xì)胞系-建立細(xì)胞系的要求
什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，特別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說明：
1、組織來源：細(xì)胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。
2、細(xì)胞生物學(xué)檢測：
了解細(xì)胞一般和特殊的生物學(xué)性狀，如細(xì)胞一般形態(tài)，特異結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細(xì)胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。
3、培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說明細(xì)胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值?！ ?/p>
細(xì)胞系-建株要點和過程
（一）腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)要點
1、取材：材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織，取材時避免用壞死組織，要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位，瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng)，因故不能立即培養(yǎng)者，可凍存。其培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
2、成纖維細(xì)胞排除：在腫瘤組織中?；祀s有一些成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)時能與瘤細(xì)胞同時生長，并常壓過癌細(xì)胞，導(dǎo)致癌細(xì)胞生長受阻以至消失，應(yīng)仔細(xì)排除。排除方法常有：機械刮除法、反復(fù)貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
3、提高腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗，腫瘤細(xì)胞在體外不易培養(yǎng)，建立能傳代的腫瘤細(xì)胞系更為困難。一般當(dāng)腫瘤組成或細(xì)胞被原代培養(yǎng)后，要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長，因此不能局限于一般培養(yǎng)法，須采用一些特殊措施。如：用適宜底物，鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等。用細(xì)胞生長因子，根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子，如胰島素、氫化可的松，雌激素等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。
（二）人類淋巴母細(xì)胞建株方法
l、4ml肝素抗凝血于離心管中，加入2mlRPMI1640。
2、混勻后沿管壁緩慢加到預(yù)置有4ml淋巴細(xì)胞分離液的液面上靜置30min。
3、1500rpm，15min，吸取白細(xì)胞層（第二層）于另一離心管中。
4、加RPMI16405ml洗滌白細(xì)胞兩次。
5、將白細(xì)胞接種至1mlRPMI1640培養(yǎng)基中，加入10μl環(huán)胞霉素和100μl的EBV（EB病毒）液，混勻。
6、水浴搖床，40次/分，37℃，3hr。
7、1500rpm，15min。將細(xì)胞接種至1ml培養(yǎng)基中（內(nèi)含谷氨酰胺1mM／ml）加入10μl環(huán)胞霉素，輕輕混勻，37℃培養(yǎng)。
8、5天后觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)化和生長情況，決定是否半量換液。一般半量換液l—2次，并維持環(huán)胞霉素的濃度。
9、待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升，并出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊后，可轉(zhuǎn)入25ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，加1—2ml培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)10-15天，一般每隔3-4天觀察一次，決定是否換液，傳代。
10、細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后凍存，凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔?！ ?/p>
細(xì)胞系-鑒定、管理和使用
當(dāng)一個細(xì)胞系建成后，中國常通過組織專家開鑒定會的形式予以鑒定，從學(xué)術(shù)角度考慮，此舉實非必要。按國際慣例，只要研究認(rèn)真負(fù)責(zé)地把有關(guān)資料在雜志或刊物上報道，詳細(xì)介紹上述各項目即可。
以前因未建立統(tǒng)一的細(xì)胞庫時，對已建立的細(xì)胞系（株）多由作者單位自行保管，有浪費人力、交流使用不便、細(xì)胞易污染和丟失等弊病。我國已初建成小規(guī)模貯存細(xì)胞機構(gòu)，待獲進(jìn)一步發(fā)展，這對我國細(xì)胞培養(yǎng)必將有更大促進(jìn)作用。
國際上美、英和日本等國已建有細(xì)胞庫；美國已有美國標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫或細(xì)胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細(xì)胞庫（HGMR）、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界最大的細(xì)胞庫。ATCC下屬有一組協(xié)作實驗室和一個由眾多專家組成的咨詢委員會。ATCC也是美國國立癌癥研究所（NCI）和美國衛(wèi)生研究所中（NIH）的資源庫，尤與NCI有密切的關(guān)系。ATCC也是世界衛(wèi)生組織WHO的國際培養(yǎng)細(xì)胞文獻(xiàn)中心。ATCC現(xiàn)液氮凍存有3200個已經(jīng)過鑒定的細(xì)胞系（1992），其中包括來自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細(xì)胞系；和來自不同物種的近75個雜交瘤細(xì)胞株。ATCC接納來自世界各國已經(jīng)鑒定的細(xì)胞予以貯存，同時也向世界各國的研究者或?qū)嶒炇颐赓M提供研究用細(xì)胞（做盈利性研究時收費。）ATCC接納入庫細(xì)胞時，必須符合其入庫標(biāo)準(zhǔn)，ATCC入庫細(xì)胞要求檢測項目如下：
培養(yǎng)簡歷：組織來源日期、物種、組織起源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態(tài)、細(xì)胞已傳代數(shù)等
凍存液：培養(yǎng)基和防凍液名稱
細(xì)胞活力：融解前后細(xì)胞接種存活率和生長特性
培養(yǎng)液：培養(yǎng)基種類和名稱（一般要求不含抗生素）、血清來源和含量
細(xì)胞形態(tài)：類型，如為上皮或成纖維細(xì)胞等，融解后細(xì)胞生長特性
核型：二倍體或多倍體，標(biāo)記染色體的有無
物種檢測：檢測同工酶，主要為G6PD和LDH，以證明細(xì)胞有否交叉污染以及反轉(zhuǎn)錄酶檢測
細(xì)胞建立者：建立者姓名；檢測者姓名
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